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液相色谱仪的日常维护和保养
点击次数:3704 发布时间:2017-02-09

HPLC仪器的日常维护与保养

 

        一套HPLC系统大致分为以下几个部分:流动相前处理部分、输液部分、进样部分、分离部分、检测部分。下面将分两期介绍各部分的使用方法和注意事项。*期先介绍流动相前处理部分和输液部分。

一、流动相前处理

       流动相前处理主要包括过滤和脱气,使用设备主要为溶剂过滤器、真空泵和超声波。

      1、过滤。HPLC所用流动相必须预先过滤和脱气,过滤的作用是防止颗粒性的杂质堵塞系统,或影响单向阀的正常工作。过滤时需要注意滤膜的选择,油膜和水系膜必须分开使用。水膜易有机溶剂溶解而进入系统导致泵流路和色谱柱头的堵塞。

      2、超声。超声的作用是去除流动相中的气泡。超声时间一般在20min即可。超声后,液体温度会升高,应冷却到室温再使用。超声后的流动相若需隔天使用再次超声。

二、输液系统

        输液系统即是指高压恒流泵,其作用是能提供稳定准确的流速。泵的维护主要分为以下三个部分。

       1、溶剂过滤头。吸液过滤头,或称沉子,主要作用是过滤流动相中可能存在的颗粒性杂质。长时间使用后,杂质有可能阻塞溶剂过滤头上的过滤板孔隙;或长时间使用缓冲液,过滤头表面容易产生一层膜,阻碍流动相正常通过。严重时,即使是已超声过的溶剂,泵吸液时也会有气泡在四氟输液管里产生,因此应经常对过滤头进行清洗。清洗溶剂可以选择乙醇或者30%稀硝酸溶液,正相系统需注意滤头的烘干处理。

       2、单向阀。单向阀的作用是确保液体向一个方向流动,是高压恒流泵稳定输液的保证。日常使用过程中,可以通过观察压力的情况,初步判断流量是否正常。如果系统已经平衡一段时间,压力应该是稳定的。但如果压力存在波动,则表明流量不稳定;如果无压力,则表明无流量。这两种情况大多是因为单向阀里混入了气泡或杂质。混入气泡的情况,应把放空阀打开,按冲洗键将里面的气泡排出。单向阀混入杂质的情况,须对其进行清洗。清洗溶剂可以选择乙醇,安装时注意标记环的方向。

 

                                                           单向阀装配图及剖面图

                       1 带标记环阀外套;2 陶瓷座;3 宝石球;4 带密封垫限位套;5 密封垫

 

       3、密封圈。密封圈是固定在柱塞杆上防止泵腔内的液体泄漏,是保证泵头输液正常的关键部件。但柱塞杆和柱塞密封圈长期使用会发生磨损,主要与流量、操作压力和所使用的流动相有关。当使用含盐的流动相时,由于脱水或蒸发,可能形成盐结晶,而泵运动时盐结晶会导致密封圈和柱塞杆的磨损。因此,每天实验前和实验后都需用纯水冲洗一次密封圈(在柱塞密封圈和二级密封圈之间),保持清洗管内有水以防止形成晶体,延长柱塞杆和密封圈的使用寿命。

       等度系统                       梯度系统

                                         

                          柱塞杆清洗连接示意图

 

  

       4、在线过滤器。为了防止由于流动相杂质微粒进入色谱系统,泵在放空阀内安装了在线过滤器,经泵出口流出的液体通过在线过滤器,经排空管流出的液体不通过在线过滤器。仪器使用一定时间后,建议用户清洗在线过滤器的烧结不锈钢过滤片。用扳手卸下压帽,将密封环和烧结不锈钢过滤片一同取出清洗,清洗后按原位装上。清洗溶剂可以选择30%稀硝酸溶液,正相系统需注意滤头的烘干处理。

 

             在线过滤装置示意图

 

 

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